Zielgruppe:
Dieser Kurs richtet sich an Laboranwender, die bereits Erfahrung mit HPLC haben und regelmäßig mit methodischen Herausforderungen konfrontiert sind. Typische Probleme wie nicht reproduzierbare Methoden, Peaks mit schwankenden Retentionszeiten, mangelnde Auflösung von Peaks oder die Schwierigkeiten, die bei der Methodenübertragung von einem Gerät auf ein anderes oder von Labor zu Labor auftreten können, werden gezielt behandelt. Vorzugsweise werden die Trennprobleme an eigenen Proben besprochen, um spezifische Lösungen für die Teilnehmer zu erarbeiten.
Kursdauer:
1-2 Tage, vor Ort beim Kunden.
Maximale Teilnehmerzahl:
6 Teilnehmer
Kursinhalte:
- Einführung in die HPLC-Methodenoptimierung
Überblick über moderne Technologien wie UHPLC, sub-2µm Partikel, Core Shell und 2D-Chromatographie. Die Optimierung der HPLC konzentriert sich primär auf die Verbesserung der Auflösung und die Robustheit der Trennung. - Schlüsselherausforderungen in der HPLC
- Umgang mit ähnlichen Strukturen, Polaritäten und Molekülgrößen: Strategien, um selbst schwer zu trennende Verbindungen zu separieren.
- Apparative und chromatographische Bedingungen zur Optimierung der Robustheit, der Auflösung, der Empfindlichkeit und der Geschwindigkeit der Methoden.
- Lösungsmittelselektivitäten als Optimierungstool: Der gezielte Einsatz von Lösungsmitteln zur Verbesserung der Selektivität und Auflösung.
- Grüne Lösungsmittel: Ersatz klassischer HPLC-Lösungsmittel durch umweltfreundliche Alternativen ermöglichen aber auch andere Selektivitäten.
- Optimierungsstrategien für verschiedene Substanzen
- Säuren, Basen, Zwitterionische Verbindungen, polare Substanzen, Neutralstoffe: Wie gehe ich bei der Trennung dieser Stoffe vor?
- Welche Faktoren sind für die Reduzierung der Nachweisgrenze und die Optimierung der Auflösung entscheidend?
- Kann der pH-Wert der mobilen Phase die Empfindlichkeit der Methode beeinflussen?
- Methodenübertragung
- Was ist zu beachten, wenn Methoden von einem HPLC-System auf ein anderes übertragen werden? Typische Probleme und Lösungsansätze.
- Praktische Übungen zur Methodenoptimierung
- Hands-on-Sessions, in denen die Teilnehmer Strategien lernen, wie sie Methoden optimieren können. Schwerpunkt liegt auf der Anpassung der stationären und der mobilen Phase, Flussrate, pH-Wert der mobilen Phase, der Temperatur und wichtiger apparativer Parameter.
- Besprechung des Trennproblems der Teilnehmer und Anwendung der erlernten Strategien am eigenen Beispiel.
Ziel:
Nach Abschluss des Kurses sind die Teilnehmer in der Lage, HPLC-Methoden eigenständig zu entwickeln und zu optimieren, typische Fehler zu vermeiden und Methoden sicher auf andere Geräte oder Labore zu übertragen.
Zertifikat:
Nach erfolgreichem Abschluss des Kurses wird ein Zertifikat ausgegeben.